尊龙凯时推出的猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）是一款用于检测猪血清中猪瘟病毒抗体的高效工具。该产品广泛应用于对猪瘟疫苗免疫效果的评估。猪瘟由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起，是一种高度接触性、出血性和致死性的传染病，主要表现为高热、广泛出血、坏死及梗塞现象。

【产品名称】
通用名：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）
英文名：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus（ELISA）

【包装规格】
规格分为96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒。

【储存及有效期】
本试剂盒应在2～8℃保存，有效期为12个月。开封后的包被板需避光保存，并应在2个月内使用。

【适用仪器】
推荐使用含450nm、630nm波长的酶标仪和37℃恒温设备，同时需准备可调微量移液器。

【样品准备】
1. 采用常规方法制备动物全血血清，确保血清清晰、无溶血和污染。样品应在1周内置于2～8℃保存，长期需放在-20℃保存。
2. 将待检血清用样品稀释液按40倍稀释（如将5μl血清加入195μl稀释液中，充分混匀）。阴性、阳性对照无需稀释。
3. 使用前将浓缩洗涤液恢复至室温，并用蒸馏水或去离子水稀释至20倍（如19份蒸馏水或去离子水加1份浓缩洗涤液）。

【检验方法】
1. 使用前将试剂盒置于室温30分钟，使其恢复至常温。
2. 取所需试剂量的酶标板条，并设定阴性/阳性对照各2孔。未用的板条需尽快密封并保存于2～8℃。
3. 分别在阴性、阳性对照孔中加入100μl对照液，在样品孔中加入100μl稀释后的样品。
4. 混匀后，覆盖盖板膜，置于37℃（推荐使用水浴）避光反应30分钟。
5. 用以甩去孔内液体，每孔加入350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。
6. 每孔加入100μl酶标记物，盖好盖板膜，放置37℃避光反应30分钟。
7. 重复洗涤步骤5。
8. 每孔依次加入底物液A、底物液B各50μl，混匀，盖好盖板膜，置于37℃避光反应10分钟。
9. 每孔加入50μl终止液，混匀后，于450nm（可用630nm作参比波长）测定每孔的吸光值。

【参考值】
在正常实验条件下，阴性对照的平均OD值（ODNC）应≤0.3，阳性对照的平均OD值（ODPC）应≥0.6。

【检验结果的判定】
1. 样品的OD值为ODS。
2. 计算阈值：SP值=（ODS-ODNC）/（ODPC-ODNC）；若SP值≥0.2，则结果判定为阳性；若SP值＜0.2，则判定为阴性。
3. 若结果为阴性，表示猪只抗体水平不足，建议进行相应疫苗补打。

【试验方法的局限性】
本试验主要用于定性检测猪血清、血浆中猪瘟病毒抗体，依据SP值的高低可粗略评估抗体水平。

【注意事项】
1. 实验过程中须佩戴手套和工作衣，严格实施消毒隔离制度，所有实验废弃物应按照传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，避免与皮肤和衣物接触，如有接触请立即用大量水冲洗。
3. 酶标板取出时需在室温恢复后开袋，未用完的板应放入有干燥剂的密封袋中保存。
4. 低温下浓缩洗涤液容易结晶，使用前需恢复至室温以充分溶解。
5. 在洗涤时确保每孔均加满液体，以避免游离酶未被洗净。
6. 使用前需确保样品新鲜。
7. 结果判定必须依赖酶标仪的读数。
8. 不同批号的试剂组分不得混用。